SP6 RNA聚合酶

其他中文名稱 ： SP6核糖核酸聚合酶

英文名稱 ： SP6 RNA Polymerase

級(jí) 別 ： BR

分子量 ： 單體約98kDa

保 存 ： -20℃

來 源 ： 大腸桿菌細(xì)胞，含有編碼相應(yīng)RNA聚合酶的克隆基因

濃 度 ： 20u/ul（≥100U/ul，HC）

活力定義 ： 是指在37℃、60分鐘內(nèi)將1nmol AMP合成摻入到寡聚核苷酸片段（DE-81)光吸收形式）所需的酶量

酶活性分析混合物 ： 40mM Tris-HCL(PH8.0), 10mM DTT, 6mM MgCL2, 2mM 亞精胺，0.5mM 各種NTP, 0.6MBq/ML(3H).-ATP和20ug/ml含有相應(yīng)啟動(dòng)子序列的質(zhì)粒DNA

保存緩沖 ： 每種聚合酶保存于50mM Tris-HCL(PH8.0), 5mM DTT, 0.1mg/ml BSA,150mM NaC1, 0.5mM ELUGENT去污劑和50%(V/V) 甘油

5×轉(zhuǎn)錄緩沖液 ： 200mM Tris-HCL(PH9.0,25℃), 30mM MgCL2, 50mM DTT, 50mM NaC1和10mM 亞精胺

抑制劑 ： 金屬螯合劑，當(dāng)NaC1或KC1濃度高于150mM(SP6和T7 RNA聚合酶）時(shí)，酶活性降低超過50%，硫酸銨可使酶活性降低超過50%

失 活 ： 加入EDTA或者70℃加熱10分鐘

質(zhì)量控制 ： 相關(guān)測試表明無內(nèi)切或外切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染

功能測試 ： 體外轉(zhuǎn)錄反應(yīng)

特 點(diǎn) ： 合成摻入特殊核苷酸，如氨基-、生物-素-、熒光素-、地高xin-標(biāo)記的核苷酸

性 狀 ： 液體,SP6核糖核酸聚合酶是一種依賴DNA的聚合酶，對(duì)SP6啟動(dòng)子序列表現(xiàn)高度專一性。用該酶合成RNA，僅能以SP6 DNA或克隆在SP6 啟動(dòng)下游的DNA作為合成模板。該酶能以32P，35S及3H標(biāo)記的核苷三磷酸為底物

用 途 ： 生化研究。合成標(biāo)記和未標(biāo)記的RNA，用于雜交、體外RNA翻譯；作為RNA、siRNA、RNase酶切保護(hù)分析的底物以及基因組DNA測序的模板；研究RNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)和RNA-蛋白質(zhì)相互作用、RNA剪接；標(biāo)記的RNA探針合成，用于印跡實(shí)驗(yàn)、原位雜交、microarray雜交